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當(dāng)前位置:首頁(yè)  >  產(chǎn)品中心  >  常用試劑  >  普通試劑  >  C6203凝膠回收試劑盒(含柱)

凝膠回收試劑盒(含柱)

簡(jiǎn)要描述:凝膠回收試劑盒(含柱)
本試劑盒配套的膜結(jié)合液和離心吸附柱的最大吸附量為 20µg,對(duì) 100-10000 bp 線性雙鏈 DNA 片段的回收效率可高達(dá) 50-90%,也可用于單鏈 DNA 片段和質(zhì)粒 DNA 的純化。

  • 產(chǎn)品型號(hào):C6203
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2023-05-21
  • 訪  問(wèn)  量: 554

詳細(xì)介紹

品牌Bioss貨號(hào)C6203
供貨周期現(xiàn)貨應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

凝膠回收試劑盒(含柱)

保存條件 室溫干燥可保存一年,4℃保存可更長(zhǎng)時(shí)間。

使用時(shí)如發(fā)現(xiàn)結(jié)晶,可于 37~55?C水浴加熱助溶。離心吸附柱不建議低溫或大于 30?C 保存,否則可能影響吸附效率。

凝膠回收試劑盒(含柱)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

膠回收試劑盒利用硅基質(zhì)材料在高鹽緩沖系統(tǒng)對(duì) DNA 高效、專(zhuān)一吸附的原理,配備聚合美自主研發(fā)的膜結(jié)合液(又稱(chēng)溶膠液)和高性能的硅膠膜離心吸附柱,可在 15 分鐘內(nèi)清除凝膠、核酸染料及其他雜質(zhì),高效回收 DNA 片段。本試劑盒配套的膜結(jié)合液和離心吸附柱的最大吸附量為 20µg,對(duì) 100-10000 bp 線性雙鏈 DNA 片段的回收效率可高達(dá) 50-90%,也可用于單鏈 DNA 片段和質(zhì)粒 DNA 的純化。因回收率受 DNA 片段大小、濃度等因素的綜合影響,故應(yīng)盡量加大電泳的 DNA 片段濃度,以提高回收率。回收后的 DNA 片段可以直接用于酶切、連接、測(cè)序、標(biāo)記、雜交和體外轉(zhuǎn)錄等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。



回收效率

50 bp 回收效率:30-50%

100-200 bp 回收效率:50-70%

200-5000 bp 回收效率:70-90%

5 kb-10 kb 回收效率:50-70%



產(chǎn)品組份

膜結(jié)合液(MB):25ml (50T)

膜漂洗液(MW):15ml (50T) 初次使用前請(qǐng)按瓶標(biāo)說(shuō)明加入無(wú)水乙醇混勻

洗脫緩沖液(EB):10ml (50T)

平衡液(BL):25ml (50T) 請(qǐng)使用當(dāng)天平衡液處理過(guò)的吸附柱

離心吸附柱及收集管:50(50T) 室溫密閉干燥保存



實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

用戶(hù)需自行準(zhǔn)備的材料:含 DNA 樣品的瓊脂糖凝膠,無(wú)水乙醇,異丙醇, 55oC 水浴,切膠設(shè)備,臺(tái)式離心機(jī)。

初次使用本試劑盒,請(qǐng)按瓶標(biāo)說(shuō)明向膜漂洗液(MW)中加入相應(yīng)體積的無(wú)水乙醇(用戶(hù)自備),并在試劑瓶上做標(biāo)記。



操作步驟

1. 柱平衡:向吸附柱中(吸附柱放入收集管中)加入 400 μl 的平衡液 BL,12,000 rpm (-13,400×g ) 離心 1 min,棄收集管中濾液,將吸附柱重新放回收集管中。(請(qǐng)使用當(dāng)天處理過(guò)的柱子,這一步很重要,試劑盒放置時(shí)間長(zhǎng)不用,處理一下效果如新,減少浪費(fèi)。如果新開(kāi)封馬上用,可以不做柱平衡)

2. 切膠:用干凈刀片將目的 DNA 條帶切下,盡量切除不含 DNA 的凝膠。注意:紫外線對(duì) DNA 片段有損壞作用,切膠要迅速,避免長(zhǎng)時(shí)間照射,同時(shí)做好眼睛及皮膚的防護(hù)。

3. 稱(chēng)重:將切下的含有目的 DNA 條帶的凝膠切成小塊,放入已稱(chēng)重的 1.5 ml 塑料離心管中,再稱(chēng)重(總重-空重=凈重)。

4. 溶膠:加入等體積膜結(jié)合液(MB),60℃水浴,每隔 2-3 min 上下振蕩,直到凝膠*溶解。注意:如凝膠重量為 100 mg,其體積可視為 100 ul,則加入 100 ul 膜結(jié)合液;如凝膠濃度大于 2%,所用膜結(jié)合液體積加倍;對(duì)于  回收

<300 bp 的小片段或者大于 3000bp 的大片段,可在凝膠*溶解后再加入 1/2 膠塊體積的異丙醇以提高回收率;膠塊*溶解后最好將溶液溫度降至室溫再上柱,因?yàn)槲街谑覝貢r(shí)結(jié)合 DNA 的能力較強(qiáng)。

5. 吸附:待溶液冷卻后加入離心吸附柱中,室溫靜置 2 min,讓 DNA 片段與吸附柱中的硅膠膜充分結(jié)合,然后 12,000 rpm 離心 1 min,棄收集管中濾液。注意:如總體積超過(guò) 750 ul 可分 2 次將溶液加入同一離心吸附柱中;為增加目的 DNA 片段的洗脫濃度,也可將多管溶膠液加入到同一離心吸附柱中。

6. 清洗:加入 600 ul 的膜漂洗液(MW),12,000 rpm 離心 1 min,棄收集管中廢液。注意:膜漂洗液(MW)按要求加入乙醇,用后應(yīng)立即蓋緊瓶蓋,以防酒精揮發(fā); 如后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求純度較高,可再清洗一次。

7. 干燥:將離心吸附柱于 12,000 rpm 離心 2 min,甩干殘留漂洗液。注意:此步不能省略,否則殘留乙醇會(huì)影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

8. 洗脫:將離心吸附柱置于一個(gè)新的 1.5 ml 塑料離心管中,在吸附柱中央加入 30-50 ul 洗脫緩沖液(EB),室溫放置 2 min。12,000 rpm 離心 1 min 收集 DNA 片段。注意:為增加回收效率,可將洗脫液在 60℃預(yù)熱,也可將得到的溶液重新加入到離心管中,室溫放置 2 min,再次離心收集。如需使  用去離子水洗脫,可用 NaOH 調(diào)整其 pH 值在 7.0-8.5 之間)。




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